【污水治理】高選擇性重組基因工程菌治理含汞廢水
創(chuàng)飛格環(huán)保高選擇性重組基因工程菌治理含汞廢水方案
1 實驗材料
實驗中所用的菌株為廈門大學化學工程與生物工程系生物工程實驗室利用大腸桿菌E.coliBL21(DE3)為宿主菌，經(jīng)帶有汞操縱子基因和金屬硫蛋白編碼基因的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化而得到的基因工程菌。汞操縱子基因在細胞膜處表達出高特異性的外膜汞結合蛋白和內(nèi)膜汞轉(zhuǎn)運蛋白，同時金屬硫蛋白基因在細胞體內(nèi)表達出對重金屬有高結合能力的金屬硫蛋白。金屬硫蛋白是一組富含巰基的低分子量蛋白質(zhì)，它既可高容量地結合重金屬離子，又可在細胞體內(nèi)消除重金屬離子對細胞本身的毒害作用。為便于重組菌株的篩選，在重組質(zhì)粒中引入了氨芐(Amp)和卡那(Kan)兩種抗生素選擇性標記。
基本培養(yǎng)基為LB培養(yǎng)基(g/L)：蛋白胨10.0；酵母提取物5.0；NaClO。
2 實驗方法
2.1菌種保存
在500mL搖瓶中將重組菌接種到200mL含50mg/L氨芐霉素和30mg/L卡那霉素的LB培養(yǎng)基中，在37℃下振蕩培養(yǎng)至OD600約為4(振蕩速率為170min)，在1.5mL無菌微型離心管中加入870 L細菌培液中和130 L88%的甘油，混合后用液氮速冷，然后保存在-80℃。
2.2汞離子的生物富集
在l000mL搖瓶中裝入300mLLB培養(yǎng)液，加入50mg/L氨芐霉素和30mg/L卡那霉素，然后接入lmI細菌～甘油培養(yǎng)液，在37℃下振蕩(振蕩速率為170rain)培養(yǎng)至過夜.取少量菌液接種到相同的LB培養(yǎng)液中，使初始菌體密度為OD400值0.1～0.3，37℃下振蕩培養(yǎng)至OD6000.5～0.7時添加誘導物異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)至終濃度為1.0mM.再次振蕩培養(yǎng)4h，4℃下離心收獲菌體待用.菌體在使用前先用磷酸緩沖液洗滌，然后懸浮于含不同濃度汞離子的模擬電解廢水中，在37℃下振蕩培養(yǎng)1h，離心收集菌體。為測量菌體內(nèi)所富集的汞離子含量，將收集的菌體干燥后用70%的高純度硝酸溶液消化過夜?？疾旄患俾蕰r，在不同的時間用0.2 m孔徑的醋酸纖維膜收集菌體，以使菌體和處理液盡快分離開來。由于重金屬離子易于被容器器壁吸附而導致實驗誤差，實驗中所用的所有導管和玻璃容器使用前都用20%的硝酸溶液浸泡過夜，然后用去離子水浸洗干凈。
3 結論
經(jīng)重組基因轉(zhuǎn)化的基因工程菌具有很強的從廢水中富集汞離子的能力。廢水中共存離子的存在加快了重組菌的富集速率，但卻導致菌體的平衡富集能力下降了30%。pH的變化對重組菌的富集行為影響很小，且重組菌對汞離子的富集能力比一般的生物吸附法有很明顯的提高。
廢水治理項目合作流程
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實地考察 |
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了解水質(zhì) |
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定制方案 |  |
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設備選型 |
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設備安裝 |  |
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水質(zhì)監(jiān)測 |
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是否委托 |  |
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服務承諾 本公司本著“技術第一、服務第一、信譽第一”的宗旨，向用戶鄭重承諾
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按客戶要求完成工程任務，保證工程質(zhì)量； |
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經(jīng)本公司設計和提供的污水處理裝置，經(jīng)本設施處理后保證達到地方標準和國標排放標準； |
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主體設備保修一年，終生提供技術服務，設備在運轉(zhuǎn)過程中出現(xiàn)問題，4小時內(nèi)給予答復，24小時內(nèi)安排專業(yè)人員赴現(xiàn)場服務； |
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保修期滿，我司對設備保養(yǎng)、維修僅收取一定成本費。與用戶建立長期聯(lián)系和技術交流，以最新的技術服務于用戶，免費提供技術咨詢和服務； |
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廢水處理系統(tǒng)調(diào)試期間，本公司為廠方編寫《廢水處理站操作規(guī)程》，并負責培訓技術人員。包括日常操作管理、設備操作規(guī)程、常見故障檢修、設備定期保養(yǎng)、水質(zhì)分析等； |
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定期組織客戶回訪工作，了解系統(tǒng)運行狀況，認真處理客戶反饋的意見，做好工程技術咨詢工作。 |
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